Metabolizem glukoze v hipoosmotskih razmerah pri podganjih astrocitih

Astrociti so celice glije, ki so do nedavnega veljale le za spremljevalne celice v osrednjem živčnem sistemu. Astrociti dovajajo hranila živčnim celicam, odstranjujejo izrabljene metabolite in živčne prenašalce. Najnovejše raziskave so odkrile še druge vloge astrocitov: odzovejo se na aktivnost živčnih celic in izločajo prenašalce, ki vplivajo na sinaptični prenos informacij. V hipoosmotski zunajcelični raztopini se zveča prevodnost plazmaleme podganjih astrocitov v kulturi, ki kompenzirajo razlike v osmolarnosti. Namen naloge je preveriti, ali se kot odziv na hipoosmotske razmere spremeni raven glukoze v citoplazmi astrocita. Meritev bomo izvedli mikroskopsko s fluorescenčnim proteinskim nanosenzorjem.

Meritve fuzijske pore pri podganjih laktotrofih

Eksocitoza je inovacija evkariontskih organizmov. Kljub temu slabo poznana na molekularni ravni. Izolirane podganje laktotrofe bomo uporabili kot modelno celico, saj izločanje hormona prolaktina poteka že v bazalnih, nestimuliranih razmerah z eksocitozo. V procesu eksocitoze se mešički s hormonom zlivajo s plazmalemo. Zlivanje ni nenaden dogodek, temveč je zlivanje postopno in ponavljajoče. Po zlitju se med membrano mešička in plazmalemo vzpostavi ozka cevasta struktura, ki ji pravimo fuzijska pora. Lastnosti fuzijske pore bomo izmerili z elektrofiziološko metodo »patch-clamp« in sicer z meritvami membranske prevodnosti in kapacitivnosti.

Naslov: Dinamika in fuzija sekrecijskih organelov v reaktivnih astrocitih

Nevroni in celice glije komunicirajo prek kemičnih signalov, kar je ključnega pomena za normalno delovanje živčnega sistema. Med poškodbo živčnega tkiva se astrociti reaktivirajo. V stanju reaktivne glioze se zveča ekspresija intermediarnih filamentov, ki lahko vplivajo na mobilnost znotrajceličnih organelov, tudi lizosomov. Lizosomi so organeli, ki se zlivajo s plazmalemo in so tako pomembno vključeni v predstavitev antigenov. Namen naloge je izmeriti mobilnost znotrajceličnih organelov (npr. lizosomov) pri astrocitih. Za zajemanje časovnih posnetkov bomo uporabili občutljivo mikroskopsko kamero, za analizo posnetkov pa lasten računalniški program.

lnmcp.mf.uni-lj.si/Neuroendo/

robert.zorec@mf.uni-lj.si

marko.kreft@mf.uni-lj.si